[TiMing]：ⅡXingHeTangTiShiHuoDanBaiCinnamominDeA-、B-LianDeDaGuiMoFenLiChunHuaJiHuoXingYanJiu
[作者]：孙立伟[ZuoZhe]：SunLiWei[专业]：生物化学[ZhuanYe]：ShengWuHuaXue
[导师]：李惟[DaoShi]：LiWei[学位]：硕士[XueWei]：ShuoShi
[单位]：吉林大学[DanWei]：JiLinDaXue
[关键词]：Ⅱ型核糖体;失活蛋白;分离纯化;活性
[时间]：19990401[页数]：50页[点击]：20051[分类号]：Q512[语种]：中文文摘[来源]： 毕业论文
[文摘]：Ⅱ型核糖体失活蛋白A、B链的分离纯化在研究它们的活性、结构以及构建免疫毒素等应用方面具有重要意义.该文以香樟种子匀浆液所制备的种子粗提液,通过Sepharose 4B柱亲和层析,一步纯化得到Cinnamomin,收率为75mg Cinnamomin/100g种子.Cinnamomin用β--巯基乙醇还原后,经3M或4M尿素处理,经过DEAE--52离子交换柱层析,得到纯化的Cinnamomin A链和B链,收率分别为25﹪和95﹪,纯化的A链具有RNA N-糖苷酶活力.B链则失去了凝集素活力.经4M尿素处理后纯化的B链在含0.1M乳糖的缓冲液中复性后,经Sepharose 4B亲和柱层析,可进一步纯化到具有凝集素活性的B链.同时进行了Cinnamomin A、B链的荧光光谱研究,发现色氨酸残基对A链的RNA N--糖苷酶活性的影响可能不大,或者表明经4M尿素15℃处理后Cinnamomin A链的结构可能发生了较大的改变;活性B链的色氨酸残基处于疏水的内核环境中,复性后的活性B链可能接近于其天然的活性结构.
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